Đánh giá khả năng bắt aflatoxin g1 của cột ái lực miễn dịch do viện pasteur tp. Hồ Chí Minh sản xuất

MỤC LỤC CHƯƠNG TRANG Trang tựa Lời cảm tạ iii Tóm tắt .iv Abstract .v Mục lục vi Danh sách các chữ viết tắt .ix Danh sách các hình v Danh sách các bảng .vi Danh sách các biểu đồ .vi 1. ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Đặt vấn đề 01 1.2 Mục đích 02 1.3 Yêu cầu 02 2. TỔNG QUAN 2.1 Đại cương về aflatoxin .03 2.1.1 Lịch sử phát hiện .03 2.1.2 Phân loại .04 2.1.3 Tính chất hoá lí .05 2.1.4 Tác động sinh học .05 2.1.4.1 Độc tính cấp 07 2.1.4.2 Độc tính mãn .08 2.1.5 Sự hiện diện trong thực phẩm .10 2.1.6 Giới hạn về hàm lượng trong thực phẩm và thức ăn gia súc .10 2.2 Các phương pháp phân tích aflatoxin 12 2.2.1 Phương pháp sinh học 12 2.2.2 Phương pháp phân tích hoá lí .12 2.2.2.1 Lấy mẫu .13 2.2.2.2 Chiết aflatoxin 13 2.2.2.3 Làm sạch mẫu .14 2.2.2.4 Cô đặc mẫu 14 2.2.2.5 Phát hiện và xác định hàm lượng .14 2.2.3 Phương pháp miễn dịch học 16 2.3 Sắc kí ái lực miễn dịch (IAC – ImmunoAffinity Chromatography) .17 3. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 3.1 Thời gian và địa điểm .20 3.1.1 Thời gian 20 3.1.2 Địa điểm .20 3.2 Vật liệu 20 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu .20 3.2.2 Hóa chất 20 3.2.3 Dụng cụ .20 3.2.4 Thiết bị 21 3.3 Phương pháp nghiên cứu 21 3.3.1 Các phương pháp phục vụ cho nghiên cứu 21 3.3.1.1 Quy trình tạo giá ái lực miễn dịch .21 3.3.1.2 Phương pháp quang phổ kế để xác định nồng độ AFG1 23 3.3.1.3 Quy trình chiết xuất, cô đặc và tinh chế AFG1 với cột IAC 3.3.1.4 Phương pháp dùng huỳnh quang kế đo lường lượng AFT 3.3.2 Xây dựng đường chuẩn cho AFG1 bằng huỳnh quang kế .26 3.3.3 Khảo sát các chỉ tiêu 27 3.3.3.1 Độ nhạy của cột 27 3.3.3.2 Độ lặp lại của cột 28 3.4 Phương pháp xử lí số liệu .28 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Cột IAC 2,5 do Viện Pasteur Tp. HCM sản xuất 29 4.2 Nồng độ dung dịch AFG1 chuẩn xác định bằng quang phổ kế .29 4.3 Đường chuẩn AFG1 dựa trên huỳnh quang kế 29 4.4 Độ nhạy của cột .30 4.5 Độ lặp lại của cột .31 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận .34 5.2 Đề nghị 34 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO .35 Phụ lục