Màng tái tổ hợp PLLA/Bmattacin2 từ peptide kháng khuẩn của tằm và Poly L- Lactic acid (PLLA) cho ứng dụng y sinh học.

Nhóm 10Màng tái tổ hợp PLLA/Bmattacin2 từ peptide kháng khuẩn của tằm và Poly L- lactic acid (PLLA) cho ứng dụng y sinh học.Thành viên:Mai Thị Thùy Duyên 1318051Văn Mỹ Lan 1318177Trần Thị Ngọc 1318251ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINHKHOA SINH HỌC – CÔNG NGHỆ SINH HỌCGVHD: PGS.TS Trần Lê Bảo Hà.NỘI DUNGĐẶT VẤN ĐỀIMÀNG PLLAIIBMATTACIN2 IIIMÀNG PLLA/BMATTACIN2IVVKẾT LUẬNI. ĐẶT VẤN ĐỀThiết kế các vật liệu có chức năng chống oxy hóa, chống viêm, kháng khuẩn và chống ung thư bằng cách bổ sung: → Hạt nano bạc: tăng nồng độ → hoạt tính kháng khuẩn tăng nhưng lại tăng khả năng gây độc tế bào+ Mohiti-Asli, M. et al+ Jin, G. et al → Một số loại thuốc như 5-fluorouracil (5-FU): điều trị ung thư nhưng lại gây hại đến các tế bào bình thường.Thiết kế vật liệu kháng khuẩn, chống ung thư cao, gây độc thấp hơn.ĐỀ XUẤTMàng PLLA/Bmattacin2 II. MÀNG PLLAPolymer nhiệt dẻo, bán tinh thể, giòn và rắn.Có khả năng phân hủy sinh họcPoly L - lactic acidỨng dụng trong màng bao thực phẩm, dẫn truyền thuốc, vật liệu y sinhTương thích sinh học Là peptide kháng khuẩn được tạo dòng từ 2 gen attacin2 và cecropinB1 ở tằm. + Peptide kháng khuẩn (AMP) là nhóm các peptide có khả năng tiêu diệt những vi sinh vật xâm nhập của hệ thống miễn dịch bẩm sinh ở hầu hết các sinh vật.+ AMPs mang đặc điểm chung là có điện tích cation bề mặt và có các vùng ưa nước và vùng kỵ nước tạo thành màng lưỡng cực (phân cực).+ AMPs thường có sự ổn định nhiệt và kháng sinh phổ rộng.Khả năng nhắm mục tiêu tế bào ung thư Khả năng kháng khuẩn.III. BMATTACIN2III. BMATTACIN2ĐẶC TÍNH: a. Khả năng của Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thư. Đối tượng:Tế bào ung thư (tế bào hắc tố ác tính A375 và tế bào ung thư đại trực tràng HCT116 ở người)Tế bào đối ứng bình thường (nguyên bào sợi da bao quy đầu người HFF-1 và tế bào ruột kết của thai nhi FHC). Kết quả: 2 mM Bmattacin2 sau 24 giờ ủ Kết luận Bmattacin2 có thể giết chọn lọc tế bào ung thư A375 và HCT116 mà vẫn duy trì các tế bào đối ứng bình thường của nó a. Khả năng của Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thưIII. BMATTACIN21. ĐẶC TÍNH: b. Khả năng kháng khuẩn của Bmattacin2. Đối tượng: S. maicesceis và B. Bombysepticus ( 2 loại vi khuẩn thường được tìm thấy trong tằm nhiễm).E. coli ATCC25922, E. coli DH5α và S. aureus ATCC25923 (ba chủng vi khuẩn phổ biến trong phòng thí nghiệm)b. Tác dụng kháng khuẩn của Bmattacin2KẾT LUẬN: Bmattacin2 có phổ kháng khuẩn rộng, với từng lượng khác nhau Bmattacin2 có thể ức chế tiêu diệt các vi khuẩn gram âm và gram dương Kết quả:Thí nghiệm so sánh tác động của Bmattacin2Ủ với Bmattacin2 trong 30’Đối tượng:+E. Coli+ S. aureus+HCT116+FHC+A375+HFF-1Khi xâm nhập vào tế bào, kết hợp với các thành phần quan trọng của tế bào, kích hoạt giải phóng enzyme tự phân giải, ức chế tổng hợp DNA, RNA,.... 2. CƠ CHẾ BMATTACIN2:Bám lên màng tế bào vi khuẩn Peptide kháng khuẩn chèn vào lớp màng lipid kép, hình thành các kênh vận chuyển tự do dẫn đến làm dung giải màng tế bào vi khuẩn.Sự tác động chọn lọc của peptide kháng khuẩn Bmattacin2Các yếu tố liên quan đến tác động chọn lọc : + Điện tích màng.+ Cholesterol làm giảm hoạt động của các peptide kháng khuẩn. + Tế bào vi khuẩn dễ bị nhân tố lạ xuyên màng.=> Các peptide kháng khuẩn luôn ưu tiên tương tác với vi khuẩn hơn với tế bào động vật, nhờ đó chúng tiêu diệt các vi sinh vật mà không gây độc đáng kể đến tế bào chủ.IV. MÀNG PLLA/BMATTACIN21. ĐẶC TÍNH2. PHƯƠNG PHÁP TẠO MÀNG1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2a. Hoạt động chống ung thư của màng PLLA/Bmattacin2 Khả năng di động của HCT116 sau khi gieo hạt trên màng phức hợp chế tạo trong 4 giờ, 1 ngày và 3 ngày.1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2- Tế bào quan sát: HCT116 Cấy trên bề mặt màng phức hợp chế tạo Thời gian: 3 ngày. Kết quả:+(b1-b4) nhuộm tế bào sống/chết.+ (b5-b8) nhuộm huỳnh quang của các tế bào bởi DAPI/FITC. +(b9-b16) SEM quan sáta. Hoạt động chống ung thư của màng PLLA/Bmattacin2 Tính kháng khuẩn:Khảo sát đặc tính khác khuẩn của màng PLLA/Bmattacin2 + Đối tượng: E. coli and S. aureus + Đối chứng âm: màng PLLA1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2.b. Hiệu lực kháng khuẩn của màng PLLA/Bmattacin2  1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2Nhuộm vi khuẩn bằng SYTO 9 và propidium iodide + vi khuẩn sống (xanh)+vi khuẩn chết (màu đỏ) => tác dụng kháng khuẩn của PLLA/Bmattacin2. b. Hiệu lực kháng khuẩn của màng PLLA/Bmattacin2  1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2c. Khả năng tương thích của màng PLLA/Bmattacin2  2. PHƯƠNG PHÁP TẠO MÀNG: 3 bướcTạo dòng.Chuẩn bị dung dịch PLLA/Bmattcin2.Phương pháp quay điện hóa (electrospinning) để tạo màng PLLA/Bmattacin2IV. MÀNG PLLA/BMATTACIN2V. KẾT LUẬNMàng PLLA / Bmattacin2 là một vật liệu có tính tương thích sinh học cao, có khả năng kháng khuẩn, chống tế bào ung thư mà không gây ảnh hưởng đến các tế bào bình thường.Với những đặc điểm này, màng nano PLLA / Bmattacin2 là loại vật liệu hứa hẹn, có một tiềm năng lớn cho các ứng dụng y sinh học trong việc tái tạo da, điều trị ung thư, và chữa lành vết thương.