Luận án Nghiên cứu khả năng làm giảm mật độ các gốc tự do gây bởi bức xạ ion hóa của các hợp chất tự nhiên

t quả chính nghiên cứu của đề tài này được chỉ ra như sau: 1. Đã định lượng được tỷ lệ đứt gãy của DNA plasmid khi bị chiếu xạ bởi bức xạ gamma (LET thấp), bức xạ helium (LET cao) trong điều kiện môi trường chứa DNA không có các chất chống oxy hóa và chứa các chất chống oxy hóa như AA, EGCG, EC. Khi môi trường chứa DNA plasmid có các chất chống oxy hóa, tỷ lệ tổn thương trên DNA plasmid đã giảm, nói cách khác AA, EGCG, EC có tác dụng bảo vệ DNA plasmid khỏi tác động có hại của bức xạ ion hóa. 2. Đã định lượng được tỷ lệ sống sót của tế bào nấm men khi bị chiếu xạ bởi bức xạ ion hóa (bức xạ gamma, bức xạ helium) khi nấm men được nuôi cấy trong môi trường YPD lỏng không có chất chống oxy hóa và chứa chất chống oxy hóa như AA và EGCG. Với tất cả các hàm lượng 300 µM, 500 µM và 1000 µM của AA và EGCG, kết quả thực nghiệm đều cho thấy tỷ lệ sống sót của tế bào tăng. Nghĩa là AA và EGCG có tác dụng bảo vệ tế bào chống lại các bức xạ ion hóa. 3. Đã đưa ra kết quả thực nghiệm về ảnh hưởng của LET đến mức độ tổn thương bức xạ của DNA và tế bào sống. Bức xạ có LET cao sẽ gây ra nhiều tổn thương hơn đối với DNA và tế bào sống. 4. Từ sự phân tích và so sánh giữa các giá trị thực nghiệm, luận án đã đưa ra được tỷ lệ tổn thương tương đối của DNA plasmid khi được bảo vệ bởi hợp chất EGCG và EC có trong chè xanh từ đó đi đến kết luận EGCG có khả năng chống oxy hóa tốt hơn so với EC. 106 5. Bằng việc đánh giá tỷ lệ bảo vệ tế bào theo hàm lượng mol, kết quả thực nghiệm cho thấy AA có khả năng bảo vệ tốt hơn so với EGCG ở nồng độ 300 µM và 1000 µM. 6. Kết quả thực nghiệm tỷ lệ sống của tế bào phụ thuộc vào liều chiếu trong đó hàm lượng của EGCG và AA trong môi trường nuôi cấy nấm men YPD thay đổi từ 0 µM, 300 µM, 500 µM, 1000 µM cho thấy tỷ lệ sống không tỷ lệ với nồng độ. Dựa vào sự phụ thuộc này chúng tôi nhận thấy EGCG với hàm lượng 500 µM và AA với hàm lượng 300 µM bảo vệ tốt nhất tế bào nấm men khỏi bức xạ ion hóa. 7. Từ số liệu thực nghiệm, dựa vào đường cong đáp ứng liều xác định được các thông số theo phương trình LQ. Giá trị của hằng số α và α/β trong phương trình LQ đối với bức xạ LET thấp và LET cao giảm khi môi trường nuôi cấy tế bào nấm men có bổ sung EGCG và AA. Giá trị của α/β có xu hướng giảm khi môi trường sống của tế bào nấm men có bổ sung EGCG, AA. Điều này chỉ ra rằng EGCG, AA làm giảm sự đứt gãy của các phân tử DNA và giảm đột biến trong các tế bào bị chiếu xạ. Những đóng góp mới của luận án: 1. Kết quả nghiên cứu của luận án đã định lượng được tỷ lệ đứt gãy DNA plasmid và tỷ lệ sống của tế bào nấm men bị chiếu xạ bởi bức xạ gamma và chùm helium. 2. Xác định được hàm lượng chất chống oxy hóa EGCG và AA thích hợp để giảm mức độ tổn thương DNA, và bảo vệ tế bào nấm men khỏi tác động gây chết của hai loại bức xạ trên. 3. Đây cũng là nghiên cứu đầu tiên ở Việt Nam đánh giá tác động của chiếu xạ chùm ion helium đối với DNA và tế bào nấm men. Kết quả nghiên cứu giúp mở rộng hợp tác của cơ sở đào tạo với các cơ sở nghiên cứu về Vật lý hạt nhân và Sinh học phóng xạ của Nhật Bản trong thời gian tới. 107 NHỮNG ĐỊNH HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO 1. Nghiên cứu tần suất đột biến của tế bào theo liều chiếu của bức xạ ion hóa (LET thấp và LET cao), trong đó tế bào được nuôi cấy trong môi trường bổ sung chất chống oxy hóa để hiểu được vai trò của các chất chống oxy hóa trong việc giảm đột biến của tế bào. Trong chương 1, đã đề cập đến việc phóng xạ có thể dẫn đến đột biến tế bào. Tế bào bị đột biến cũng có thể sống sót và phát triển sau khi tiếp xúc với bức xạ ion hóa. Điều này có nghĩa là, tất cả các khuẩn lạc được đếm để lấy dữ liệu tỷ lệ sống sót cũng bao gồm các tế bào bị đột biến. Trong thời gian tới, dự kiến sẽ tiếp tục phát triển các phương pháp thực nghiệm nhằm đánh giá tỷ lệ đột biến của tế bào theo liều chiếu với nguồn gamma và helium, các chất chống oxy hóa sử dụng là AA, EGCG và EC, hàm lượng các chất chống oxy hóa thay đổi từ 0-1000 µM. Kết quả nghiên cứu dự kiến đó là: các chất chống oxy hóa đã được sử dụng không những nâng cao tỷ lệ sống sót của tế bào mà còn giảm tỷ lệ đột biến của tế bào. 2. Nghiên cứu hiệu quả bảo vệ phóng xạ kết hợp của EGCG và AA đối với DNA plasmid và tế bào vi khuẩn. Nghiên cứu D. Mireles chỉ ra rằng khi có sự kết hợp giữa EGCG, AA và Omega 3, EGCG đạt hàm lượng cao nhất trong huyết tương. Chỉ riêng AA có thể cải thiện quá trình hấp thụ của EGCG trong tương bào, tăng cường hiệu quả chống oxy hóa của EGCG [101]. Do đó, chúng tôi đề xuất rằng trong những nghiên cứu tiếp theo sẽ tiến hành nghiên cứu với sự kết hợp giữa EGCG và AA, việc bảo vệ bức xạ chống lại tổn thương DNA do tiếp xúc với bức xạ có thể tối ưu hơn. 3. Nghiên cứu hiệu quả bảo vệ phóng xạ của EGCG, EC, AA đối với DNA plasmid và tế bào động vật. Kết quả nghiên cứu của luận án một cung cấp bộ số liệu thực nghiệm cho thấy EGCG, EC, AA có khả năng bảo vệ DNA và tế bào nấm men khỏi tia bức xạ có LET thấp và cao. Bên cạnh đó, kết quả luận án cũng chỉ ra rằng tỷ lệ sống của tế bào và tỷ lệ đứt gãy của DNA không tỷ lệ thuận với hàm lượng mol chất trong môi trường nuôi cấy của tế bào nấm men và môi trường trữ DNA plasmid, từ những kết quả này sẽ làm cơ sở cho các nghiên cứu tiếp theo khi tiến hành 108 trên tế bào động vật trong lĩnh vực bảo vệ an toàn bức xạ. DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN. 1. Tran Thi Nhan, Youichirou Matuo, Yoshinobu Izumi, Maradi Abdillah, Lukas Wisnu Wicaksono, Vuong Thu Bac, Comparison of radiation protection effects between epigallocatechin gallate and ascorbic acid, Salud, Ciencia y Tecnología, 2023, 3, p.564 https://doi.org/10.56294/saludcyt2023564 (Tạp chí quốc tế thuộc danh mục Scopus, link tham khảo https://www.scopus.com/sourceid/21101131037). 2. Thi Nhan Tran, Lukas Wisnu Wicaksono, Maradi Abdillah, Youichirou Matuo, Kikuo Shimizu, Kyo Kume and Yoshinobu Izumi, Radiation protection of yeast cells and dna by epigallocatechin gallate and epicatechin, Radioisotopes, 2022, 71, pp. 245–253. https://doi.org/10.3769/radioisotopes.71.245 (Tạp chí quốc tế) 3. Tran Thi Nhan, Youichirou Matuo, Maradi Abdillah, Lukas Wisnu Wicaksono, and Yoshinobu Izumi, Ascorbic acid as a radiation-protective agent against ionizing radiation, 8th International Conference on the Development of Biomedical Engineering in Vietnam, IFMBE Proceedings 85, Springer Nature Switzerland AG, 2022, p.845-857. https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-3-030-75506-5_69 (Proceeding hội nghị thuộc danh mục Scopus, link tham khảo https://www.scimagojr.com/journalsearch.php?q=1680-0737). 4. Tran Thị Nhan, Vuong Thu Bac, Dang Duc Nhan, tác dụng bảo vệ bức xạ đối với tế bào nấm mem bằng việc bổ sung Epigallocatechin Gallate, Hội nghị Khoa học và Công nghệ hạt nhân toàn quốc lần thứ 15, Nha Trang, 09-11/8/2023. 5. Trần Thị Nhàn, Youichirou Matuo, Vương Thu Bắc, Đặng Đức Nhận, Yoshinobu Izumi, Nghiên cứu khả năng bảo vệ tế bào khỏi các bức xạ ion hóa của epigallocatechin gallate bằng phản ứng chuỗi polymerase (PCR), 109 Hội nghị Khoa học và Công nghệ hạt nhân toàn quốc lần thứ 14, Đà Lạt, 09-10/12/2021. 6. Trần Thị Nhàn, Tác dụng bảo vệ tế bào nấm men của epigallocatechin gallate (EGCG) khỏi các tổn thương ion hóa gây bởi chùm tia rơnghen (tia X), Hội Thảo Khoa Học Quốc Gia Các Nhà Nghiên Cứu Trẻ, 11/2019, pp. 248-351. 110 TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Radiation Biology: A Handbook For Teachers And Students, International Atomic Energy Agency, 2010, Vienna. 2. Phan Sỹ An, Trần Xuân Trường, Mai Trọng Khoa Và Cộng Sự, Y Học Hạt Nhân, NXB Y Học, 2005, Hà Nội. 3. Weeden Ce, Asselin-Labat Ml, Mechanisms of DNA damage repair in adult stem cells and implications for cancer formation, Biochimica Et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis Of Disease, 2018, 1864(1), pp. 89-101. 4. Bing Tian, Zongtao Sun, Chemiluminescence analysis of the prooxydant and antioxydant effects of epigallocatechin-3-gallate, Asia Pac J Clin Nutr, 2007, 16 (1), pp. 153-157. 5. Jiang Wu, Wenfeng Gou, Zhiyun Wang, Huajie Chang, Deguan Li, Wenbin Hou, Changxiao Liu, Discovery of the radio - protecting effect of Ecliptae Herba, its constituents and targeting p53-mediated apoptosis in vitro and in vivo, Acta Pharmaceutica Sinica B, 2023, 13(3), 1216- 1230. 6. Đào, N. L. A., Duyên, H. T. K., Thịnh, N. Q., Phú, T. M., Hạ, N. T. N., Osako, K. ., & Ohshima, T. O. T, Ảnh hưởng của cao chiết từ ba loài nấm ăn đến khả năng chống oxy hoá dầu cá, Tạp chí Khoa học Đại học cần Thơ, 2021, 57, pp. 91-98. https://doi.org/10.22144/ctu.jvn.2021.068 7. Đỗ Thị Gấm, Hà Việt Hải, Chu Hoàng Hà, Phạm Bích Ngọc, Khảo sát một số đặc điểm hóa học và tác dụng chống oxy hóa (antioxydant) của các hợp chất Flavonoid chiết xuất từ một số loài lan Kim tuyến của Việt Nam, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên và Công nghệ, 2017, 33 (1S), pp. 104-113. 111 8. Vo Thi Thuong Lan, Dinh Ba Tuan, Ta Bich Thuan, Tran Bang Diep, Tran Minh Quynh, UV light induced DNA damages and the radiation protection effects of Lingzi mushrom extract, Nuclear Science and Technology, 2016, 6(3), pp. 40-47. 9. Tran Minh Quynh, Enhancing Radical Scavenging Activity of Cordyceps Militaris Extract by Gamma Irradiation, Vietnam J. Chem., 2022, 60 (5), pp. 681-684. 10. Pham Cam Nam, Asit K. Chandra , Minh Tho Nguyen, Performance of an integrated approach for prediction of bond dissociation enthalpies of phenols extracted from ginger and tea, Chemical Physics Letters, 2014, 555, pp. 44-50. 11. Okunieff P, Swarts S, Keng P, Sun W, Wang W, Kim J, Yang S, Zhang H, Liu C, Williams JP, Huser AK, Zhang L., Antioxydants reduce consequences of radiation exposure, Adv Exp Med Biol. 2008, 614, pp.165-78. 12. Food And Nutrition Board, Dietary Reference Intakes For Vitamin C, Vitamin E, Selenium, And Carotenoids, National Academy Press, 2000, Washington DC. 13. Duarte TL, Lunec J., When Is An Antioxydant Not An Antioxydant? A Review Of Novel Actions And Reactions Of Vitamin C, Free Radical Research, 2005;39(7), pp. 71-686. 14. Sudha J. Devaki And Reshma Lali Raveendran, Vitamin C: Sources, Functions, Sensing And Analysis, 2017, Croatia 15. Tolbert BM, Downing M, Carlson RW, Chemistry and metabolism of ascorbic acid and ascorbate sulfate, The Annals Of The New York Academy Of Science, 1975, 258, pp. 48-69. 112 16. Paul H. Johnson and Lawrence I. Grossman, Electrophoresis of DNA in agarose gels, optimizing separations of conformational isomers of double- and single-stranded DNAs, Biochemistry, 1977, 16(19), pp. 4217-4225. 17. Shigehiko Tabuse, Yoshinobu Izumi, Takao Kojima, Yoichi Yoshida, Takahiro Kozawa, Miyako Miki, Seiichi Tagawa, Radiation protection effects by addition of aromatic compounds to N-dodecane, Radiation Physics and Chemistry, 2001, 62, pp. 179–187. 18. Youichirou Matuo, Yoshinobu Izumi, Norihito Sato, Takayoshi Yamamoto, Kikuo Shimizu, Evaluation of DNA lesions caused by high- LET radiation using the polymerase chain reaction, Radiation Measurements, 2013, 55, pp. 93-95. 19. Youichirou Matuo, Shigehiro Nishijima, Toshiji Ikeda, Kikuo Shimizu, Radical scavenging effect of naturally-occuring epigallocatechin gallate against oxydative damage caused by gamma-ray radiation, Radioisotopes, 2008, 57 (12), pp. 723-731. 20. Wolfgang Domej, Karl Oettl, Wilfried Renner, Oxydative stress and free radicals in copd – implications and relevance for treatment, International Journal Of COPD, 2014, 9,pp. 1207-1224. 21. Nadia Rega, Maurizio Cossi, Vincenzo Barone, Development and validation of reliable quantum mechanical approaches for the study of free radicals in solution, J. Chem. Phys, 1996, 105, pp. 11060–11067. 22. Phan Sỹ An và cộng sự, Lý Sinh Y Học, NXB Y Học, 1998, Hà Nội. 23. Michael Joiner, Albert Van Der Kogel, Basic Clinical Radiobiology, Hodder Education, An Hachette UK Company, 2009, London. 113 24. Straume, T.; Carsten, A. L., Tritium radiobiology and relative biological effectiveness, Health Physics, 1993, 65(6), pp. 657-672. 25. Clemens Von Sonntag, Free-radical-induced DNA damage and its repair-a chemical perspective, Springer Verlag Berlin Heidelberg New York, 2005. 26. Rangaswamu Krupashankar, Radiation Biology-An Insight, Lambert Academic Publishing, 2014, Deutschland. 27. Dejian Huang, Boxyn Ou and Ronald L. Prior, The chemistry behind antioxydant capacity assays, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2005, 53, pp. 1841-1856. 28. Michael Antolovich, Paul D. Prenzler, Emilios Patsalides, Suzanne McDonald and Kevin Robards, Methods for testing antioxydant activity, Analyst, Analyst, 2002, 127, pp. 183-198. 29. Ayse Karadag, Beraat Ozeelik and Samim Saner, Review of Methods to Determine antioxydant capacities, Food Anal. Methods, 2009, 2, pp. 41- 60. 30. Volker Bohm and Karin Schlesier, Methods to evaluate the antioxydant activity, Institute of Nutrition, 2004, Netherlands. 31. Likhitkar M, Pande M. Antioxydant activity of methanolic and ethanolic extracts of Pueraria tuberosa plant, Int J Ind Herbs Drugs, 2017, 2(1), pp. 1 – 5. 32. Miller NJ, Rice-Evans C, Davies MJ, Gopinathan V, Milner A, A novel method for measuring antioxydant capacity and its application to monitoring the antioxydant status in premature neonates. Clinical Science, 1993, 84(4), pp. 407-412. 114 33. Rice-Evans CA, Miller NJ, Paganga G, Structureantioxydant activity relationships of flavonoids and phenolic acids, Free Radical Biology and Medicine. 1996, 20(7), pp. 933-956. 34. Pannala AS, Chan TS, O'Brien PJ, Rice-Evans CA, Flavonoid B-ring chemistry and antioxydant activity: fast reaction kinetics, Biochemical and Biophysical Research Communications, 2001, 282(5), pp. 1161- 1168. 35. Tyrakowska B, Soffers AEMF, Szymusiak H, Boeren S, Boersma MG, Lemańska K, et al., TEAC antioxydant activity of 4-hydroxybenzoates, Free Radical Biology and Medicine, 1999, 27(11-12), pp.1427- 1436. 36. Volker Bohm and Karin Schlesier, Methods to evaluate the antioxydant activity, Kluwer Academic Publishers, 2004, Dordrecht. 37. Boxyn Ou, Dejian Huang, Maureen Hampsch-Woodill, Judith A. Flanagan and Elizabeth K. Deemer, Analysis of antioxydant activities of common vegetables employing oxygen radical absorbance capacity (ORAC) and ferric reducing antioxydant power (FRAP) assays: A comparative study, J Agric. Food Chem, 2002, 50 (11), pp. 3122-2128. 38. Changjiang Guo, Jijun Yang, Jingyu Wei, Yunfeng Li, Jing Xu, Yugang Jiang, Antioxydant activities of peel, pulp and seed fractions of common fruits as determined by FRAP assay, Nutrition Research, 2003, 23, pp. 1719–1726. 39. Ju-Ying Tsai, Fang-Hsin Chen, Tsung-Yu Hsieh And Ya-Yun Hsiao, Effects Of Indirect Actions And Oxygen On Relative Biological Effectiveness: Estimate Of DSB Induction And Conversion Induced By Gamma Rays And Helium Ions, Journal Of Radiation Research, 2015, 56(4), pp. 691–699 115 40. Pannala AS, Chan TS, O'Brien PJ, Rice-Evans CA, Flavonoid B-ring chemistry and antioxydant activity: fast reaction kinetics, Biochemical and Biophysical Research Communications, 2001, 282(5), pp. 1161- 1168. 41. Boxyn Ou, Dejian Huang, Maureen Hampsch-Woodill, Judith A. Flanagan and Elizabeth K. Deemer, Analysis of antioxydant activities of common vegetables employing oxygen radical absorbance capacity (ORAC) and ferric reducing antioxydant power (FRAP) assays: A comparative study, J Agric. Food Chem., 2002, 50 (11), pp. 3122-2128. 42. Øyvind M. Andersen and Kenneth R. Markham, Flavonoids, Chemistry, Biochemistry and Applications, Taylor & Francis Group, 2006, New York. 43. Yang S.H., Pettiette C.L., Conceicao J., Cheshnovsky O., Smalley R.E., Ups of buckminsterfullerene and other large clusters of carbon, Chem. Phys. Lett., 1987, 139(3-4), pp. 233-238. 44. Jovanovic S.V., Steenken S., Tosic M., Marjanovic B., Simic M.G., Flavonoids As Antioxydants, J. Am. Chem. Soc., 1994, 116(11), pp. 4846-4851. 45. Luca Capaldo, Davide Ravelli, Hydrogen atom transfer (HAT): a versatile strategy for substrate activation in photocatalyzed organic synthesis, European Journal of Organic Chemistry, 2017, 15, pp. 1978- 2204. 46. Jovanovic S.V., Steenken S., Hara Y., Simic M.G., Reduction potentials of flavonoid and model phenoxyl radicals. Which ring in flavonoids is responsible for antioxydant activity?, J. Chem. Soc., Perkin Trans, 1996, 2 (11), pp. 2497. 116 47. Foti M.C., Daquino C., Geraci C., Electron-transfer reaction of cinnamic acids and their methyl esters with the DPPH(*) radical in alcoholic solutions, J. Org. Chem., 2004, 69(7), pp. 2309-2314 48. Litwinienko G., Ingold K.U., Abnormal solvent effects on hydrogen atom abstractions. 1. the reactions of phenols with 2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl (DPPH*) in alcohols, J. Org. Chem., 2003, 68(9), pp. 3433-3438. 49. Zhang H.Y., Ji H.F., How vitamin E scavenges DPPH radicals in polar protic media, New Journal of Chemistry, 2006, 30(4), pp. 503-504. 50. Nguyen Minh Thong, Duong Tuan Quang, Ngoc Hoa Thi Bui, Duy Quang Dao, Pham Cam Nam, antioxydant properties of xanthones extracted from the pericarp of garcinia mangostana (Mangosteen): A theoretical study, Chemical Physics Letters, 2015, 625, pp. 30-35. 51. Parmar Namita, Rawat Mukesh and Kumar J. Vijay, Camellia sinensis (green tea): a review, Global Journal of Pharmacology, 2012, 6 (2), pp. 52-59. 52. Phuong N.T.M., Dao N.T.N., Ảnh hưởng của polyphenol lá chè xanh (camellia sinensis l.) lên vi khuẩn sâu răng streptococcus mutans trên mảng bám răng, Tạp Chí Dược Liệu, 2003, 4, pp. 110-114. 53. Diane L. Mckay, Jeffrey B., The role of tea in human health: an update, Journal of The American College of Nutrition, 2002, 21 (1), 2002, pp. 1- 13. 54. Bradfield A.E., Penny M., Wright W.B., The catechins of green tea, part i., J. Chem. Soc., 1947, pp. 32-36; 117 55. Guang-Jian Du, Zhiyu Zhang, et al., Epigallocatechin gallate (EGCG) is the most effective cancer chemo preventive polyphenol in green tea, Nutrients, 2012, 4, pp. 1679-1691. 56. Mukhtar H., Ahmad N., Tea polyphenols: prevention of cancer and optimizing health, American Journal of Clinical Nutrition, 2000, 71 (6), pp. 1694-1703. 57. Fumio Nanjo, Masao Mori, Et Al., Radical scavenging activity of tea catechins and their related compounds, Bioscience Biotechnology and Biochemistry, 1999, 63(9), pp. 1621-1623. 58. Pham Cam Nam , Asit K. Chandra, Minh Tho Nguyen, Performance of an integrated approach for prediction of bond dissociation enthalpies of phenols extracted from ginger and tea, Chemical Physics Letters, 2013, 555, pp. 44-50. 59. Bing Tian Phd, Zongtao Sun BS, Zhenjian Xu MS And Yuejin Hua Phd, Chemiluminescence analysis of the prooxydant and antioxydant effects of epigallocatechin-3-gallate, Asia Pac J Clin Nutr, 2007, 16(1), pp. 153-157. 60. Kazunari Kondo, Masaaki Kurihara, Naoki Miyata, Takashi Suzuki, And Masatake Toyoda, Scavenging mechanisms of (-)-epigallocatechin gallate and (-)-epicatechin gallate on peroxyl radicals and formation of superoxyde during the inhibitory action, Free Radical Biology & Medicine, 1999, 27 (7/8), pp. 855–863. 61. Qiong Guo, Baolu Zhao, Shengrong Shen, Jingwu Hou, Jungai Hu, Wenjuan Xin, ESR study on the structure - antioxydant activity relationship of tea catechins and their epimers, Biochimica Et Biophysica Acta, 1999, 1427, pp.13-23. 118 62. M. Momen Heravi, B. Haghi , A. Morsali , P. Ardalan , T. Ardalan, Kinetic study of DPPH scavenging in the presence of mixture of zinc and vitamin C as an antioxydant, Journal Of Chemical Health Risks, 2012, 2(2), pp. 43-50. 63. Sophie Champlot, Camille Berthelot, Me´lanie Pruvost, E. Andrew Bennett, Thierry Grange, Eva-Maria Geigl, An efficient multistrategy dna decontamination procedure of PCR reagents for hypersensitive PCR applications, PLoS ONE, 2010, 5 (9), pp. e13042. 64. Jeannie Tamariz B.S., Kristina Voynarovska, Mechthild Prinz Ph.D., Theresa Caragine Ph.D., The application of ultraviolet irradiation to exogenous sources of dna in plasticware and water for the amplification of low copy number DNA, Journal of forensic Sciences, 2006, 51(4), pp.790-794. 65. Pamela J. Smith M.S., Jack Ballantyne Ph.D., Simplified low-copy- number DNA analysis by post-PCR purification, Journal of forensic Sciences, 2007, 52 (4), pp. 820-829. 66. Betsy M. Sutherland, Paula V. Bennett, Alexandros G. Georgakilas, and John C. Sutherland, Evaluation of number average length analysis in quantifying double strand breaks in genomic DNAs, Biochemistry, 2003, 42(11), pp. 3375–3384. 67. Ubaldo S. Rodarte-Ramón; Robert K. Mortimer, Radiation-induced recombination in saccharomyces: isolation and genetic study of recombination-deficient mutants, Radiat Res, 1972, 49 (1), pp. 133–147. 68. Nguyễn Như Hiền, Giáo Trình Sinh Học Tế Bào, Nhà Xuất Bản Giáo Dục, 2006, Hà Nội. 119 69. Lesley. A. Mathews, Lesley A, Et Al. (Eds), DNA repair of cancer stem cells, Springer Science & Business Media Dordrecht, 2003. 70. Weeden Ce, Asselin-Labat Ml, Mechanisms of DNA damage repair in adult stem cells and implications for cancer formation, Biochimica Et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis Of Disease, 2018, 1864(1), pp. 89-101. 71. Huỳnh Xuân Phong, Nguyễn Thị Kim Huê, Lưu Minh Châu, Bùi Hoàng Đăng Long Và Nguyễn Ngọc Thạnh, Thành phần dinh dưỡng và hoạt tính kháng oxy hóa của dịch thủy phân nấm men bia saccharomyces cerevisiae, Tạp Chí Khoa Học Trường Đại Học Cần Thơ, 2020, 58 (1B), pp. 113-120. 72. C. P. De Mattos, F. J. S. Dantas‡, A. Caldeira-De-Arau´ Jo, And M. O, Moraesagarose gel electrophoresis system in the classroom- detection of DNA strand breaks through the alteration of plasmid topology, Biochemistry And Molecular Biology Education, 2004, 32(4), pp. 254– 257. 73. Svetlana Makovets, DNA electrophoresis- methods and protocols, methods in molecular biology, Springer Science And Business Media, New York, 2013. 74. Hubert Zipper, Herwig Brunner, Jurgen Bernhagen and Frank Vitzthum, Investigations on DNA intercalation and surface binding by SYBR green, its structure determination and methodological implications, Nucleic Acids Research, 2004, 32 (12), pp. e103, doi:10.1093/nar/gnh101 75. C.W. Gilbert, J.H. Hendry & D. Major, The approxymation in the formulation for survival s = exp − (αd + βd2 ), International Journal Of 120 Radiation Biology And Related Studies In Physics, Chemistry And Medicine, 1980, 37(4), pp 469-471, DOI: 10.1080/09553008014550571 76. Nicolaas A. P. Franken, Chris Van Bree, Martijn A. T. Veltmaat1 , Hans M. Rodermond , Jaap Haveman And Gerrit W. Barendsen , Radiosensitization by bromodeoxyuridine and hyperthermia: analysis of linear and quadratic parameters of radiation survival curves of two human tumor cell lines, Journal Of Radiation Research, July 2001, DOI: 10.1269/Jrr.42.179. 77. Nicolaas A.P. Franken, Arlene L. Oei1 , H. Petra Kok, Hans M. Rodermond, Peter Sminia , Johannes Crezee , Lukas J.A. Stalpers And Gerrit W. Barendsen, Cell survival and radiosensitisation: modulation of the linear and quadratic parameters of the lq model (review), International Journal Of Oncology, 2013, 42, pp. 1501-1515. 78. Ju-Ying Tsai, Fang-Hsin Chen, Tsung-Yu Hsieh And Ya-Yun Hsiao, Effects of indirect actions and oxygen on relative biological effectiveness: estimate of DSB induction and conversion induced by gamma rays and helium ions, Journal Of Radiation Research, 2015, 56(4), pp. 691–699. 79. Weeden Ce, Asselin-Labat Ml, Mechanisms of DNA damage repair in adult stem cells and implications for cancer formation, Biochimica Et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis Of Disease, 2018, 1864(1), pp. 89-101. 80. Bliss L. Tracy, David L. Stevens, Dudley T. Goodheada And Mark A. Hil, Variation in RBE for survival of V79-4 cells as a function of alpha- particle (helium ion) energy, Radiation Research, 2015, 184, pp. 33–45. 81. Dousatsu Sakata, Oleg Belov, Marie-Claude Bordage, Dimitris Emfetzoglou, Susannaguatelli, Taku Inaniwa, Vladimir Ivanchenko, 121 Mathieu Karamitros, Ioanna Kyriakou , Nathanael Lampe, Ivan Petrovic, Aleksandra Ristic-Fira, Wook-Geun Shin & Sebastien Incerti, Fully integrated monte carlo simulation for evaluating radiation induced dna damage and subsequent repair using GEANT4-DNA, Scientifc Reports, 2020, 10, pp. 207. 82. Mepur H. Ravindranath, Thiruverkadu S. Saravanan, Clarence C. Monteclaro, Naftali Presser, Xing Ye1, Senthamil R. Selvan and Stanley Brosman, Epicatechins purified from green tea (camellia sinensis) differentially suppress growth of gender-dependent human cancer cell lines, Advance Access Publication, 2006, 3(2), pp. 237–247. 83. Mao-Jung Lee, Pius Maliakal, Laishun Chen, Xiaofeng Meng, Flordeliza Y. Bondoc, Saileta Prabhu, George Lambert, Sandra Mohr, And Chung S. Yang, Pharmacokinetics of tea catechins after ingestion of green tea and (-)-epigallocatechin-3-gallate by humans: formation of different metabolites and individual variability, Cancer Epidemiol Biomarkers, 2002, 11 (10), pp. 1025–1032. 84. Yoo Seob Shin, Hyang Ae Shin, Sung Un Kang, Jang Hee Kim, Young- Taek Oh, Keun Hyung Park, Chul-Ho Kim, Effect of epicatechin against radiation-induced oral mucositis: in vitro and in vivo study, Plos One, 2013, 8(7), pp. E 69151. 85. Lan-Sook Lee, Sang-Hee Kim, Young-Boong Kim and Young-Chan Kim, Quantitative analysis of major constituents in green tea with different plucking periods and their antioxydant activity, Molecules, 2014, 19, pp. 9173-9186. 86. Kazunari Kondo, Masaaki Kurihara, Naoki Miyata, Takashi Suzuki, and Masatake Toyoda, Scavenging mechanisms of (-)-epigallocatechin gallate and (-)-epicatechin gallate on peroxyl radicals and formation of 122 superoxyde during the inhibitory action, Free Radical Biology & Medicine, 1999, 27 (7/8), pp. 855–863. 87. Yamina Boulmokh, Karima Belguidoum, Faiza Meddour & Habiba Amira-Guebailia, Investigation of antioxydant activity of epigallocatechin gallate and epicatechin as compared to resveratrol and ascorbic acid: experimental and theoretical insights, Structural Chemistry, 2021, 32, pp. 1907–1923. 88. Silvia Lo´pez-Burillo, Dun-Xian Tan, Juan C. Mayo, Rosa M. Sainz, Lucien C. Manchester and Russel J. Reiter, Melatonin, xanthurenic acid, resveratrol, EGCG, vitamin C and a-lipoic acid differentially reduce oxydative DNA damage induced by Fenton reagents: a study of their individual and synergistic actions, Journal of Pineal Research, 2003, 34, pp. 269–277. 89. Jeffrey R. Johnsa And James A. Platts, Theoretical insight into the antioxydant properties of melatonin and derivatives, Organic & Biomolecular Chemistry, The Royal Society Of Chemistry, 2014, 2014, 12, pp. 7820-7827. 90. Xianglin Shi, Jianping Ye, Stephen S. Leonard, Min Ding, Val Vallyathan, Vincent Castranova, Yon Rojanasakul, And Zigang Dong, Antioxydant properties of (-)-epicatechin-3-gallate and its inhibition of CR(VI)-induced dna damage and CR(IV)- or TPA-stimulated NF-KB activation, Molecular And Cellular Biochemistry, 2000, 206, pp. 125– 132. 91. Leon M. Dorfman, Gerald E. Adams, Reactivity of The Hydroxyl Radical in Aqueous Solution, National Standard Reference Data System, 1973, Middlesex. 123 92. Michael Sauer, Paola Branduardi, Minoska Valli, And Danilo Porro, Production Of L-Ascorbic Acid By Metabolically Engineered Saccharomyces Cerevisiae And Zygosaccharomyces Bailii, Applied and Environmental Microbiology, 2004, 7(10), pp. 6086 – 6091. 93. Saloua Kouass Sahbani, Epigallocatechin-3-gallate enhances sterilization of irradiated whole bovine casein and protects alpha and beta caseins from gamma radiation: Depending on polyphenol/protein ratio, Journal of Radiation Research and Applied Sciences, June 2023, 16(2), pp. 100531. 94. C.W. Gilbert, J.H. Hendry & D. Major, The approxymation in the formulation for survival s = exp − (αd + βd2 ), International Journal Of Radiation Biology And Related Studies In Physics, Chemistry And Medicine, 1980, 37(4), pp 469-471, DOI: 10.1080/09553008014550571. 95. Tuboi, K., Moritake, T., Tsuchida, Y., Tokuuye, K. Matsumura, A. and Ando, K., Cell checkpoint and apoptosis induction in Glioblastoma Cells and fibroblasts irradiated with carbon beam, J. Radiat. Res., 2007, 48, pp.317-325. 96. Matuo, Y., Nishijima, S., Hase, Y., Sakamoto, A., Tanaka, A. and Shimizu, K., Specificity of mutations induced by carbon ions in budding yeast Saccharomyces cerevisiae, Mutation Research, 2008, 602, pp.7- 13. 97. Carlson, D. J., Stewart, R. D. and Semenenko, V. A., Effects of oxygen on intrinsic radiation sensitivity: A test of the relationship between aerobic and hypoxyc linear-quadratic (LQ) model parameters, Med. Phys., 2006, 33, pp. 3105–3115. 98. Yu, Z., Vanstalle, M., Tessa, C. L., Jiang, G. J., et al., Biophysical characterization of a relativistic proton beam for image-guided radiosurgery, J. Radiat. Res., 2012, 53, pp. 620–627. 124 99. L G Hanin and M Zaider, Cell-survival probability at large doses: an alternative to the linear-quadratic model, Physics in Medicine & Biology, 2010, 55 (16), pp. 4687. 100. Francesca Ballarini, From DNA Radiation Damage to Cell Death: Theoretical Approaches, Journal of Nucleic Acids, 2010, pp.1-8. 101. Derliz Mereles, and Werner Hunstein, Epigallocatechin-3-gallate (egcg) for clinical trials: more pitfalls than promises, Int. J. Mol. Sci., 2011, 12, pp. 5592-5603.